强大的非共价相互作用(例如
生物素-亲和素亲和力)在蛋白质/肽纯化中起关键作用。一种新型的“
氟”(
氟代烷基)亲和力方法因其与蛋白质/肽的非特异性结合
水平低而受到欢迎。我们开发了一种新型的
水溶性
氟标记试剂,该试剂可与蛋白质/肽中的
伯胺基发生反应(通过活性磺基-N-羟基琥珀
酰亚胺基酯基)。
氟亲和力纯化后,可以通过酸不稳定的连接物的裂解来修整该标记试剂的庞大的
氟标签部分和长的低聚
乙二醇(O
EG)间隔基。碰撞诱导解离后,标记的肽离子会产生一个特征片段,该片段可从
氟亲和标签的剩余部分中回收,该片段离子可作为标记,指示相关肽已成功标记。作为原理的证明,评估了新合成的
氟标记试剂在
磷酸盐缓冲盐
水(PBS)中的肽/蛋白质标记能力。结果表明,
水性环境蛋白/肽标记和亲和富集/分离过程均非常有效。