Surface Plasmon Resonance Imaging Measurements of the Inhibition of Shiga-like Toxin by Synthetic Multivalent Inhibitors
作者:Vishal Kanda、Pavel Kitov、David R. Bundle、Mark T. McDermott
DOI:10.1021/ac050423p
日期:2005.12.1
and to detect binding events are currently being developed for high-throughput assay applications. Carbohydrates serve as attachment sites for toxins, bacteria, and viruses. Immobilized carbohydrate units can thus be used to directly detect these agents or as a platform for inhibitor assessment. In this work, modified glycosides were patterned on gold surfaces to monitor the binding of the homopentameric
目前正在开发各种新方法来在表面上构图生物分子并检测结合事件,以用于高通量分析应用。碳水化合物充当毒素,细菌和病毒的附着位点。固定的碳水化合物单元因此可以用于直接检测这些试剂或用作抑制剂评估的平台。在这项工作中,修饰的糖苷在金表面形成图案,以监测志贺样毒素(SLT)的同五聚体B5细胞识别亚基的结合。使用表面等离子体共振(SPR)成像的无标记方法检测结合。为了实现抑制性结合,使用了两种合成的多价抑制剂,并且提出了SPR成像作为ELISA研究毒素抑制的一种简单替代方法。与研究碳水化合物-蛋白质相互作用的现有方法(特别是ELISA)相反,由于减少了许多封闭,清洗和标记步骤的复杂性和人工工作,使用微图案传感器表面显示出优势。优化传感器表面上的碳水化合物受体密度,以实现SLT的最大结合。对于所研究的两种抑制剂中的每一种,测定的IC50值均在低纳摩尔范围内。