摘要:
光学荧光笔是可光活化的荧光分子,在特定波长和强度的光照射下,其光谱特性会发生显着变化。在这里,我们提出了一种新型笼状 BODIPY(4,4-difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene)荧光团的新设计策略,基于使用光可去除保护基(PRPGs)与高还原电位,通过光诱导电子转移 (PeT) 作为光敏单元和荧光猝灭剂。2,6-二硝基苄基 (DNB) 笼式 BODIPY 被有效地光活化,在水溶液中的活化率超过 600 倍。然后,我们使用成熟的 SNAP 标签技术将此光活化荧光团与 SNAP(O(6)-烷基鸟嘌呤 DNA 烷基转移酶的突变体)配体相结合,以获得用于蛋白质动力学可视化的基于小分子的光学荧光笔。作为概念证明,我们展示了活细胞中具有 SNAP 标签的表皮生长因子受体 (EGFR) 融合蛋白的时空成像。我们还展示了使用组蛋白 2A 的融合蛋白与 SNAP 标签突出显示活斑马鱼胚胎中感兴趣的细胞。