申请人:BOEHRINGER MANNHEIM GMBH
公开号:EP0350808A2
公开(公告)日:1990-01-17
Gegenstand der Erfindung sind ein Verfahren zum Nachweis von Substanzen mit Hydrolase-Aktivität in einer Probe durch Mischen der Probe mit einem Hydrolasesubstrat sowie einem Oxidationsmittel und Auswertung der entstehenden Farbintensität, dadurch gekennzeichnet, daß als Hydrolasesubstrat mindestens eine Verbindung der Formel I
in welcher
R¹ Wasserstoff oder eine Alkoxy-Gruppe
R² Wasserstoff, Halogen, eine Alkoxy-, eine Aralkoxy- oder Amino-Gruppe
R³, R⁴, R⁵ und R⁶, die gleich oder verschieden sein können, Wasserstoff, Halogen, eine Alkyl-, Alkoxy-, Aralkoxy-, Carboxyl-, Alkylcarbonyl-, Alkoxycarbonyl-, Carbamoyl-, Sulfo- oder Aminogruppe und
X eine Glykosyl-, Phosphat- oder Acylrest
bedeuten,
wobei die Reste R² und R³, R³ und R⁴ und R⁴ und R⁵ sowie R⁵ und R⁶ jeweils zu einem Ringsystem geschlossen sein können,
mindestens einer der Reste R¹ und R² Wasserstoff bedeutet und
mindestens einer der Reste R¹, R² und R³ nicht Wasserstoff bedeutet,
ein Mittel zu seiner Durchführung und neue Hydrolasesubstrate.
本发明涉及一种检测样品中具有
水解酶活性的物质的方法,该方法是将样品与
水解酶底物和氧化剂混合并评估所产生的颜色强度,其特征在于
水解酶底物是至少一种式 I 的化合物。
其中
R¹ 是氢或烷氧基
R² 是氢、卤素、烷氧基、烷氧基或
氨基
R³、R⁴、R⁵ 和 R⁶(可以相同或不同)是氢、卤素、烷基、烷氧基、烷氧基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基、
氨基甲酰基、磺酰基或
氨基,以及
X 是糖基、
磷酸基或酰基
其中
其中,R² 和 R³、R³ 和 R⁴、R⁴ 和 R⁵ 以及 R⁵ 和 R⁶ 可各自闭合形成一个环系统、
R¹ 和 R² 自由基中至少有一个是氢,以及
R¹、R²和R³基中至少有一个不是氢、
一种实施方法和新的
水解酶底物。