(DE) Zur Bestimmung der Aktivität von Lipasen tierischer, pflanzlicher und mikrobieller Herkunft sowie insbesondere im Serum detektierbarer Lipasen wurde eine Methode auf fluorimetrischer Basis entwickelt. Zu diesem Zweck wurden fluorogene Triglyceridanaloge synthetisiert, in denen eine Acyl- oder Alkylkette am $g(v)-Ende einen Fluorophor und eine andere einen Fluoreszenzquencher trägt. Für die Aktivitätsbestimmung wird das fluorogene Lipid mit Amphiphilen in Form von Liposomen, Vesikeln, Micellen oder Emulsionen solubilisiert. Das fluorogene Substrat kann auch als solches im wäßrigen Medium verteilt oder in organischen Lösungsmitteln gelöst dem Enzym angeboten werden. Als neue Solubilisierungsform für Substrate in der Lipaseanalytik werden Komplexe von fluorogenen Triglyceriden mit geeigneten Proteinen (z.B. Albumin) im wäßrigen Medium erstmals beschrieben. Die Aktivität der fettspaltenden Enzyme wird über die Hydrolyse des fluorogenen Substrates bestimmt, die mit einem kontinuierlichen Anstieg der Fluoreszenzintensität verbunden ist.(EN) A fluorometric method was developed to determine the activity of lipases of animal, vegetable and microbial origin, in particular of lipases detectable in serum. For that purpose, fluorescent triglyceride analogues were synthesised in which an acyl or alkyl chain bears a fluorophore at the $g(v)-end and another acyl or alkyl chain bears a fluorescence quencher. The fluorescent lipid is solubilised with amphiphiles in the form of liposomes, vesicles, micelles or emulsions in order to determine lipase activity. The fluorescent substrate may also be dissolved as such in an aqueous medium or be dissolved in organic solvents to be presented to the enzyme. The invention for the first time describes complexes of fluorescent triglycerides with appropriate proteins (for example albumin) in an aqueous medium as new substrate solubilisation forms for lipase analysis. The activity of lipolytic enzymes is determined through hydrolysis of the fluorescent substrate that results in a continuous increase in fluorescence intensity.(FR) On a développé une méthode fluorométrique de détermination de l'activité des lipases d'origine animale, végétale et microbienne, notamment des lipases détectables dans le sérum. A cet effet, on a synthétisé des analogues fluorescents de triglycéride dans lesquels une chaîne acyle ou alcoyle porte à l'extrémité $g(v) un fluorophore et une autre chaîne acyle ou alcoyle porte un extincteur de la fluorescence. Le lipide fluorescent est mélangé avec des amphiphiles sous forme de liposomes, de vésicules, de micelles ou d'émulsions afin de déterminer l'activité des enzymes. Le substrat fluorescent peut également être dissous tel quel dans un milieu aqueux ou être présenté à l'enzyme en dissolution dans des solvants organiques. L'invention propose pour la première fois comme nouvelles formes de solubilisation de substrats en analyse de lipases des complexes de triglycérides fluorescents avec des protéines appropriées (par exemple l'albumine) dans un milieu aqueux. L'activité des enzymes lipolytiques est déterminée par l'hydrolyse du substrat fluorescent liée à l'augmentation en continu de l'intensité de la fluorescence.
Die everywhere used method for the “determination of the activity of lipases of animal, vegetable and microbial origin, particularly in serum” has been improved. Thus, on the basis of fluorometry, “fluorogenic triglyceride analogues” twin fluors, which feature a fluorophope and a quencher, have been synthesized. For the purpose of activity determination, the fluorogenic lipid is “solubilized” into a solution by amphiphilic components in the form of liposomes, vesicles, micelles or emulsions. In addition, the fluorogenic substrate may also be dissolved in an aqueous or in organic solutions. Such solubilised substrates can be presented to the enzyme in the diluted form. A new kind of substrate solubilization for analysis of lipases is offered for the first time, which consists in the formation of complexes of fluorogenic triglycerides with appropriate proteins (e.g. albumin) in the aqueous medium.
Die everywhere 寶.flow未使用的方法已经被用来测定动物性、植物性和微
生物酶的活性,尤其是在血清中的酶 activity. 因此在荧光基础上,已制备了含有两种互补(duale)荧光物质和清除剂的
磷脂仿
生物,这些称为“荧光的 триглицеридные аналоги”. 方正是由于这对荧光物质和清除剂的存在,使得荧光的脂类物质成为了表现出这种活性的“solubilizing agent” (溶洞�物). 为了确定脂酶的活性,这些荧光的脂类物质被 amphiphilic 成分溶于溶液中,以脂质颗粒(脂osomes)、胞质小泡(vesicles)、乳([^母体])泡(micelles)或乳液(emulsions)的形式. 不仅有这种溶洞�物质还能够被溶解或被溶于
水溶液或有机溶液,这样溶洞化后的物质就可以被酶促进分解了. 这种在酶分解时产生连续性地增加的分支是在分析
脂肪酶活性时所使用的新类型物质,这样的物质就是把
磷脂仿
生物和蛋白质(例如蛋白)组合成一个双向的体系中的化合物. 脂酶的活性是通过了荧光吸光度的持续上升而被测定的.