Die Stabilisierung eines hydrolytischen Enzyms in einer flüssigen Zubereitung soll durch eine das hydrolytische Enzym stabilisierende Komponente verbessert werden. Dies gelingt durch ein Verfahren zur Anpassung eines hydrolytischen Enzyms an eine das hydrolytische Enzym stabilisierende Komponente, das die folgenden Verfahrensschritte umfasst:
a) Bereitstellen eines hydrolytischen Enzyms (Ausgangsenzym) und einer das hydrolytische Enzym stabilisierenden Komponente, die einen reversiblen Inhibitor des hydrolytischen Enzyms umfasst;
b) Verändern der Aminosäuresequenz des hydrolytischen Enzyms an mindestens einer Position durch Substitution, Deletion oder Insertion;
c) Bestimmen der relativen Aktivität des hydrolytischen Enzyms aus Schritt b) und der relativen Aktivität des Ausgangsenzyms in einer flüssigen Zubereitung;
d) Auswählen desjenigen hydrolytischen Enzyms, das eine verminderte relative Aktivität aufweist im Vergleich mit der relativen Aktivität des Ausgangsenzyms.
液体制剂中
水解酶的稳定性需要通过稳定
水解酶的成分来提高。这可以通过将
水解酶与稳定
水解酶的组分相适应的工艺来实现,该工艺包括以下步骤:
a) 提供一种
水解酶(起始酶)和一种能稳定
水解酶并包含
水解酶可逆
抑制剂的成分;
b) 通过替换、缺失或插入等方式改变
水解酶至少一个位置的
氨基酸序列;
c) 确定步骤 b) 中
水解酶的相对活性和液体制剂中起始酶的相对活性;
d) 选择相对活性低于起始酶相对活性的
水解酶。