[EN] METHODS OF LABELING TRANSIENTLY EXPRESSED PROTEINS IN LARGE-SCALE EUKARYOTIC CELL CULTURES<br/>[FR] PROCÉDÉS DE MARQUAGE DE PROTÉINES EXPRIMÉES DE MANIÈRE TRANSITOIRE DANS DES CULTURES DE CELLULES EUCARYOTES À GRANDE ÉCHELLE
申请人:WYETH CORP
公开号:WO2008060307A2
公开(公告)日:2008-05-22
[EN] The present invention is based on observations that transiently transfecting large- scale eukaryotic cell cultures with a polynucleotide encoding a protein of interest can be used to rapidly produce the large quantities of labeled proteins required for various biochemical techniques such as spectroscopy, microscopy, and crystallography, and applications including protein structure determination, protein tracing and/or localization, diagnostic and therapeutic applications, and affinity experiments. Thus, the present invention provides methods for rapidly producing large quantities of labeled proteins by using transient transfection of large-scale eukaryotic cell cultures, which are then grown in a chemically defined labeling medium that includes labeled amino acids. The present invention is also directed to methods of using the labeled proteins produced by the novel labeling methods for use in various techniques.
[FR] La présente invention est fondée sur des observations selon lesquelles la transfection transitoire de cultures de cellules eucaryotes à grande échelle avec un polynucléotide codant pour une protéine d'intérêt peut être utilisée pour produire rapidement les grandes quantités de protéines marquées nécessaires pour diverses techniques biochimiques telles que la spectroscopie, la microscopie et la cristallographie, ainsi que des applications telles que la détermination de la structure de protéines, le suivi et/ou la localisation de protéines, des applications thérapeutiques et de diagnostic, et des expériences d'affinité. La présente invention concerne ainsi des procédés pour produire rapidement de grandes quantités de protéines marquées en utilisant la transfection transitoire de cultures de cellules eucaryotes à grande échelle, lesdites cultures étant ensuite cultivées dans un milieu de marquage chimiquement défini comprenant des acides aminés marqués. La présente invention concerne également des procédés d'utilisation des protéines marquées produites par les nouveaux procédés de marquage dans diverses techniques.