我们描述了一种基于MALDI-TOF质谱的方法,该方法可快速,通用地表征蛋白激酶及其抑制剂。我们通过修饰常见的合成肽设计了新的激酶底物,例如kemptide(LRRAL S G),CaMKII底物(KRQQ S FDLF),erktide(ATGPL S PGPFGRR),abltide(EAI Y AAPFAKKK),srctide(AEEEI Y GEFEAKKKK ),神经颗粒蛋白(AAAKIQA S FRGHMARKK)和酪蛋白激酶I(CKI)底物(RRKDLHDDEEDEAM SITA)。所提出的方法基于两个基本点来改善质谱响应:1)通过稳定同位素标记的N衍生化进行质量标记技术,以及2)色氨酸精氨酸(WR)与C末端结合。有人认为,C末端与WR部分的缀合可增强这些新底物的电离能力,是原始肽的电离能力的1.5–13.7倍。我们证明了通过使用修饰的abltide(Ac-EAI Y AAPFAKKKWR-NH