脂氧合酶 (LOX) 由一类催化多不饱和
脂肪酸的区域和立体定向双加氧的酶组成。目前的报道提出,R-
脂肪氧化酶活性位点的保守甘
氨酸残基和S-
脂肪氧化酶相应位置的丙
氨酸残基在决定产物的立体
化学方面起着至关重要的作用。最近,来自 Nostoc sp. 的具有
亚油酸二醇合酶活性的双功能
脂肪氧化酶。鉴定了具有 R 立体特异性的
PCC7120 和迄今为止在手性特异性序列决定簇位置携带丙
氨酸而不是保守甘
氨酸的独特特征。在大肠杆菌中表达后纯化
重组羧基末端结构域。该酶使用酯化为庞大的
磷脂酰
胆碱分子的
亚油酸作为底物的能力表明底物的尾拳结合方向。将丙
氨酸定点诱变为甘
氨酸不会引起产物立体特异性的改变,而将丙
氨酸突变为缬
氨酸或
异亮氨酸改变了酶的区域选择性和对映选择性。动力学测量表明,用 Gly 或 Val 取代 Ala 不会显着影响反应特性,而
A162I 突变体显示 vmax 降低。根据获得的诱变数据,