作者:Antonietta M. Lillo、Ciana L. Lopez、Trideep Rajale、Hung-Ju Yen、Harsha D. Magurudeniya、M. Lisa Phipps、Eva Rose M. Balog、Timothy C. Sanchez、Srinivas Iyer、Hsing-Lin Wang、Ryszard Michalczyk、Reginaldo C. Rocha、Jennifer S. Martinez
DOI:10.1021/acs.bioconjchem.8b00354
日期:2018.8.15
Protein–ligand conjugations are usually carried out in aqueous media in order to mimic the environment within which the conjugates will be used. In this work, we focus on the conjugation of amphiphilic variants of elastin-like polypeptide (ELP), short elastin (sEL), to poorly water-soluble compounds like OPPVs (p-phenylenevinylene oligomers), triarylamines, and polypyridine-metal complexes. These conjugations
蛋白质-配体的偶联通常在水性介质中进行,以模拟偶联物的使用环境。在这项工作中,我们专注于弹性蛋白样多肽(ELP),短弹性蛋白(sEL)的两亲变体与水溶性差的化合物如OPPVs(p-亚苯基亚乙烯基低聚物),三芳基胺和聚吡啶-金属络合物。当在水相中进行时,这些缀合是有问题的,因为疏水性配体倾向于避免暴露于水,这继而引起配体自聚集和/或与两亲物的疏水性区域非共价相互作用。最终,这种行为导致结合效率低下,并被强力的非共价“结合物”污染。探索了sEL在各种有机溶剂中的溶解度后,我们建立了一种有效的偶联方法,可用于获得实际上不含污染性非共价复合物的共价结合物。当将羧基化的配体与两亲性胺缀合时,我们证明即使仅存在一种胺(N末端),其衍生化效率也达到98%。当将胺部分与两亲性羧基缀合时(有问题的构型),可以避免蛋白质多聚化,将98-100%的蛋白质缀合,并以纯净的形式回收未反应的配体。我们的合成过程在“一