One-Step, Acid-Mediated Method for Modification of Glass Surfaces with <i>N</i>-Hydroxysuccinimide Esters and Its Application to the Construction of Microarrays for Studies of Biomolecular Interactions
作者:Sungjin Park、Jaeyoung Pai、Eun-Hee Han、Chul-Ho Jun、Injae Shin
DOI:10.1021/bc100042j
日期:2010.7.21
silanols on the glass surface. Conditions for the surface modification procedure that utilize TfOH rather than Sc(OTf)3 were found to be superior. Protein and RNA-binding experiments show that glass surfaces modified by employing this method are suitable for efficient immobilization of various substances that are appended by amine, hydrazide, and alcohol functionalities. The microarrays, generated in
由于微阵列技术可作为用于生物分子相互作用的高通量分析和鉴定与生物分子结合的生物活性物质的强大工具,因此备受关注。当前用于构建微阵列的大多数方法都依赖于将物质固定在适当衍生化的表面上。在用于此目的的各种官能团中,N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯基已被广泛使用,因为它可以很容易地与目标物质中的胺或酰肼官能团反应。然而,通常通过采用不方便且费时的多步骤方法将NHS酯基引入到载玻片的表面上。在最近的研究中,我们开发了一种高效的一步法,利用NHS酯基团衍生化玻璃表面,该方法利用了NHS酯官能化的二甲基烯丙基硅烷与玻璃表面上的硅烷醇的酸介导反应。利用TfOH而非Sc(OTf)3进行表面改性的条件被发现是优越的。蛋白质和RNA结合实验表明,采用这种方法修饰的玻璃表面适用于有效固定由胺,酰肼和醇官能团附加的各种物质。以这种方式生成的微阵列适用于蛋白质,蛋白质,聚糖,蛋白质小分子和肽RNA相互作用的快速分析程