Ligand-Free Palladium-Mediated Site-Specific Protein Labeling Inside Gram-Negative Bacterial Pathogens
作者:Jie Li、Shixian Lin、Jie Wang、Shang Jia、Maiyun Yang、Ziyang Hao、Xiaoyu Zhang、Peng R. Chen
DOI:10.1021/ja402424j
日期:2013.5.15
labeling inside pathogenic Gram-negative bacterial cells via a ligand-free palladium-mediated cross-coupling reaction. Two rationally designed pyrrolysine analogues bearing an aliphatic alkyne or an iodophenyl handle were first encoded in different enteric bacteria, which offered two facial handles for palladium-mediated Sonogashira coupling reaction on proteins within these pathogens. A GFP-based bioorthogonal
钯是推进现代有机合成的关键过渡金属,它介导多种化学转化,包括有机化合物之间的许多碳-碳键形成反应。然而,扩展钯化学以结合蛋白质等生物分子,特别是在其天然细胞环境中,仍处于起步阶段。在这里,我们通过无配体钯介导的交叉偶联反应报告了致病性革兰氏阴性细菌细胞内的位点特异性蛋白质标记。两个合理设计的带有脂肪族炔烃或碘苯基手柄的吡咯赖氨酸类似物首先在不同的肠道细菌中编码,这为钯介导的 Sonogashira 偶联反应提供了两个面部手柄,用于对这些病原体内的蛋白质进行偶联反应。然后开发了基于 GFP 的生物正交反应筛选系统,允许评估各种钯试剂在促进蛋白质-小分子缀合方面的效率和生物相容性。鉴定出的简单化合物-Pd(NO3)2 在体外和活大肠杆菌细胞内对蛋白质进行位点特异性标记时表现出高效率和生物相容性。这种 Pd 介导的蛋白质偶联方法进一步用于标记和可视化志贺氏菌细胞中的 III 型分泌物 (T3S)