3alpha,7alpha-Dihydroxy-12-oxo-5beta-cholanate

• 分子结构分类: 有机化合物 - 脂质和类脂质分子 - 类固醇和类固醇衍生物
• 英文名称: 3alpha,7alpha-Dihydroxy-12-oxo-5beta-cholanate
• 英文别名: (4R)-4-[(3R,5S,7R,8R,9S,10S,13R,14S,17R)-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-12-oxo-1,2,3,4,5,6,7,8,9,11,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate
• 化学式: C24H37O5-
• 分子量: 405.5
• InChiKey: MIHNUBCEFJLAGN-DMMBONCOSA-M

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  3.9
• 重原子数：
  29
• 可旋转键数：
  3
• 环数：
  4.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.92
• 拓扑面积：
  97.7
• 氢给体数：
  2
• 氢受体数：
  5

反应信息

• 作为反应物：
  描述：

  3alpha,7alpha-Dihydroxy-12-oxo-5beta-cholanate 、 NADP⁺ 生成 3alpha-Hydroxy-7,12-dioxo-5beta-cholanate 、 氢(+1)阳离子 、 NADPH(4-)
  参考文献：
  名称：

  在寻找可持续的化学过程中：假单胞菌7α-和7β-羟基类固醇脱氢酶的克隆，重组表达和功能表征。

  摘要：

  烟酸梭状芽孢杆菌的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性7α-羟基类固醇脱氢酶（7α-HSDH）和7β-羟基类固醇脱氢酶（7β-HSDH）催化伯胆汁酸通过7-酮胆汁酸中间体发生差向异构化反应，可能适合用作生物催化具有药理学意义的胆汁酸衍生物的合成。枯草衣原体7α-HSDH已纯化至同质，N端序列已通过Edman测序确定。用简并引物对基因片段进行PCR扩增后，已通过对Absum C. absonum基因组DNA进行测序，克隆了完整的基因（786 nt）。通过对7α-HSDH基因5'末端侧翼的基因组DNA区域进行测序，获得了编码7β-HSDH（783 nt）的序列，这两个基因是连续的，可能是同一操纵子的一部分。插入合适的表达载体后，两种HSDHs已成功在大肠杆菌中以重组形式生产，通过亲和层析纯化，并进行了动力学分析，以确定米氏常数（K（m））和特异性常数（k（cat）/ K） （m））在各种胆汁酸衍生物

  DOI：

  10.1007/s00253-011-3798-x
• 作为产物：
  描述：

  3alpha,7alpha,12beta-Trihydroxy-5beta-cholanate 、 NADP⁺ 生成 3alpha,7alpha-Dihydroxy-12-oxo-5beta-cholanate 、 氢(+1)阳离子 、 NADPH(4-)
  参考文献：
  名称：

  副产梭状芽胞杆菌NADP依赖性12β-羟基甾族脱氢酶的表征。

  摘要：

  发现副淫杆菌D 762-06含有NADP依赖性的12β-羟类固醇脱氢酶，该酶已存在于未诱导的细胞中。但是，通过在生长培养基中加入具有12-酮基或12-β-羟基的胆汁酸，可以将其比活性提高至约3倍。3α-羟基-12-酮-5β-胆酸是最有效的诱导剂。通过分子筛色谱法估计最适pH为10.0，分子量为126,000。该酶制剂还原了缀合和未缀合的胆汁酸中的12-酮基并氧化了12β-羟基官能团，但是氧化活性仅为还原性胆汁酸的约25％。双取代胆汁酸的Km值低于相应的三取代胆酸，最低的Km值是在3,12-和7处观察到的。12-5个β-胆酸。没有检测到针对12个α-羟基的活性。发现该酶是热不稳定的（在50摄氏度下95％失活10分钟），但是当冻干的制剂在-20摄氏度下保存时，该活性保持了约4周。12β-羟类固醇脱氢酶的活性也是在用Triton X-100溶解后的膜级分中证实了这一点，表明它最初是与膜结合的酶。

  DOI：

  10.1016/0005-2760(88)90266-4

文献信息

• Nad-dependent 3α- and 12α-hydroxysteroid dehydrogenase activities from eubacterwm lentum atcc no. 25559
  作者：Ian A. MacDonald、David E. Mahony、Joanne F. Jellet、C.Elizabeth Meier

  DOI：10.1016/0005-2760(77)90167-9

  日期：1977.12

  Eubacterium lentum (ATCC No. 25559) was shown to contain 3alpha-and 12alpha-hydroxysteroid dehydrogenases both of which were NAD-dependent and active against conjugated and unconjugated bile salts. In addition, the 3alpha-hydroxysteroid dehydrogenase was active against members of the Androstan series containing a 3alpha-hydroxyl group regardless of the stereo-orientation of the 5-H-. No measurable

  事实表明，慢杆菌（ATCC编号25559）含有3α-和12α-羟基类固醇脱氢酶，它们都是NAD依赖性的，并且对结合和未结合的胆汁盐具有活性。另外，不管5-H-的立体取向如何，3α-羟基甾族脱氢酶对含有3α-羟基的Androstan系列成员具有​​活性。没有发现针对7α-，7β-，11β-或17β-羟基的可测量活性。通过向培养基中添加L-，D-或DL-精氨酸，大大提高了扁豆的生长以及3α-和12α-羟基类固醇脱氢酶的产生。羟类固醇脱氢酶的产量在0.50-0.75％的精氨酸范围内是最佳的。然而，精氨酸浓度大于0.75％时，生物体的生长进一步增强。12α-羟基类固醇脱氢酶具有耐热性，可以通过在50摄氏度加热45分钟来选择性失活。加热的酶制剂（仅包含3α-羟基类固醇脱氢酶）和未加热的酶制剂（包含3α-和12α-羟基类固醇脱氢酶）均可用于分光光度法定量胆汁盐。3α-和12α-羟基类固醇脱氢酶的最佳pH值分别为11
• Bile Salt Degradation by Nonfermentative Clostridia
  作者：David E. Mahony、C. Elizabeth Meier、Ian A. Macdonald、Lillian V. Holdeman

  DOI：10.1128/aem.34.4.419-423.1977

  日期：1977.10

  species (Clostridium group P) were studied. Both cultures of C. sporosphaeroides contained low amounts of 7alpha-HSDH; C. irregularis contained only a low amount of 3alpha-HSDH. All four strains of Clostridium SPH-1 contained both 12alpha- and 7alpha-HSDH in the ratio of approximately 10:1. The strain of Clostridium group P contained only 12alpha-HSDH and was devoid of any other bile salt oxidoreductases

  根据其细胞内烟碱腺嘌呤二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖的羟基甾类脱氢酶（HSDH）含量，解偶联牛磺胆酸盐的能力，生长特征和代谢产物（包括利用乳酸和丙酮酸）对八株非发酵梭菌进行了鉴定。研究了两种球孢梭状芽胞杆菌培养物（代表一株来自两种不同来源的菌株），一株不规则梭状芽胞杆菌，四株未命名物种（Clostridium组SPH-1）和一株未命名物种（Clostridium组P）。 。两种孢子囊孢子培养物均含有少量的7alpha-HSDH。不规则梭状芽胞杆菌仅含有少量的3alpha-HSDH。梭状芽胞杆菌SPH-1的所有四个菌株都包含约10：1的12alpha-和7alpha-HSDH。梭状芽孢杆菌P组菌株仅包含12α-HSDH，并且没有任何其他胆汁盐氧化还原酶。梭状芽胞杆菌P组的酶制剂可用于分光光度定量研究12alpha-OH基团。讨论了胆盐降解活性与其他表型测试的相关性，以表征和区分这种生物。
• Characterization of NADP-dependent 12β-hydroxysteroid dehydrogenase from Clostridium paraputrificum
  作者：Rudolf Edenharder、Andreas Pfützner

  DOI：10.1016/0005-2760(88)90266-4

  日期：1988.10

  Clostridium paraputrificum D 762-06 was found to contain an NADP-dependent 12 beta-hydroxysteroid dehydrogenase, already present in uninduced cells. Its specific activity could, however, be enhanced up to about 3-fold by the inclusion of bile acids with a 12-keto group or a 12 beta-hydroxy group in the growth medium. 3 alpha-Hydroxy-12-keto-5 beta-cholanoic acid was the most effective inducer. A pH

  发现副淫杆菌D 762-06含有NADP依赖性的12β-羟类固醇脱氢酶，该酶已存在于未诱导的细胞中。但是，通过在生长培养基中加入具有12-酮基或12-β-羟基的胆汁酸，可以将其比活性提高至约3倍。3α-羟基-12-酮-5β-胆酸是最有效的诱导剂。通过分子筛色谱法估计最适pH为10.0，分子量为126,000。该酶制剂还原了缀合和未缀合的胆汁酸中的12-酮基并氧化了12β-羟基官能团，但是氧化活性仅为还原性胆汁酸的约25％。双取代胆汁酸的Km值低于相应的三取代胆酸，最低的Km值是在3,12-和7处观察到的。12-5个β-胆酸。没有检测到针对12个α-羟基的活性。发现该酶是热不稳定的（在50摄氏度下95％失活10分钟），但是当冻干的制剂在-20摄氏度下保存时，该活性保持了约4周。12β-羟类固醇脱氢酶的活性也是在用Triton X-100溶解后的膜级分中证实了这一点，表明它最初是与膜结合的酶。
• In search of sustainable chemical processes: cloning, recombinant expression, and functional characterization of the 7α- and 7β-hydroxysteroid dehydrogenases from Clostridium absonum
  作者：Erica Elisa Ferrandi、Giulia Maria Bertolesi、Fausto Polentini、Armando Negri、Sergio Riva、Daniela Monti

  DOI：10.1007/s00253-011-3798-x

  日期：2012.9

  dinucleotide phosphate-dependent 7α-hydroxysteroid dehydrogenase (7α-HSDH) and 7β-hydroxysteroid dehydrogenases (7β-HSDH) from Clostridium absonum catalyze the epimerization of primary bile acids through 7-keto bile acid intermediates and may be suitable as biocatalysts for the synthesis of bile acids derivatives of pharmacological interest. C. absonum 7α-HSDH has been purified to homogeneity and the

  烟酸梭状芽孢杆菌的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性7α-羟基类固醇脱氢酶（7α-HSDH）和7β-羟基类固醇脱氢酶（7β-HSDH）催化伯胆汁酸通过7-酮胆汁酸中间体发生差向异构化反应，可能适合用作生物催化具有药理学意义的胆汁酸衍生物的合成。枯草衣原体7α-HSDH已纯化至同质，N端序列已通过Edman测序确定。用简并引物对基因片段进行PCR扩增后，已通过对Absum C. absonum基因组DNA进行测序，克隆了完整的基因（786 nt）。通过对7α-HSDH基因5'末端侧翼的基因组DNA区域进行测序，获得了编码7β-HSDH（783 nt）的序列，这两个基因是连续的，可能是同一操纵子的一部分。插入合适的表达载体后，两种HSDHs已成功在大肠杆菌中以重组形式生产，通过亲和层析纯化，并进行了动力学分析，以确定米氏常数（K（m））和特异性常数（k（cat）/ K） （m））在各种胆汁酸衍生物