作者:Huan Zhu、Gerard L. Bannenberg、Peter Moldéus、Howard G. Shertzer
DOI:10.1007/s002040050118
日期:1994.9
and stimulated by removing hypoxanthine from the reaction mixture. In contrast, SOD or elimination of hypoxanthine abolished superoxide formation. In addition, potassium superoxide did not support the oxidation of DCFH. Thus, superoxide is not involved in DCFH oxidation. Boiling xanthine oxidase eliminated its concentration-dependent oxidation of 1 microM DCFH, indicating that xanthine oxidase can enzymatically
2',7'-二氯荧光素(DCFH)氧化为荧光产物目前用于评估细胞中的氧化应激。但是,对于可能导致DCFH氧化的酶促途径和非酶促途径,存在很大的不确定性。过氧化氢酶或羟基自由基清除剂二甲基亚砜可抑制铁/过氧化氢诱导的DCFH氧化;但是,超氧化物歧化酶(SOD)对DCFH氧化没有影响。羟基自由基的形成(由水杨酸氧化为2,3-二羟基苯甲酸表示)与DCFH氧化成正比,表明羟基自由基是铁/过氧化物介导的DCFH氧化的原因。利用由次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组成的超氧化物生成系统,DCFH的氧化不受SOD,过氧化氢酶或去铁胺的影响,并通过从反应混合物中除去次黄嘌呤来刺激。相反,超氧化物歧化酶或次黄嘌呤的消除消除了超氧化物的形成。此外,过氧化钾不支持DCFH的氧化。因此,超氧化物不参与DCFH的氧化。煮沸的黄嘌呤氧化酶消除了其浓度依赖性的1 microM DCFH氧化,表明黄嘌呤氧化酶可以酶促地利用DCFH作