The present invention relates to a method of assaying modulators of the interaction between Wolframin protein and its identified cellular binding partner.
[EN] METHOD OF IDENTIFICATION OF NOVEL SUBSTRATES<br/>[FR] PROCEDE D'IDENTIFICATION DE NOUVEAUX SUBSTRATS
申请人:ALBERT EINSTEIN COLLEGE OF MEDICINE OF YESHIVA UNIVERSITY, a division of YESHIVA UNIVERSITY
公开号:WO1998036088A1
公开(公告)日:1998-08-20
(EN) The present invention provides a novel method for the rapid isolation and identification of large numbers of novel enzyme substrates. The novel method provided by the present invention identifies substrates in tissue and/or cell extracts of a non-human model characterized as having an inactive enzyme. Without active enzyme, the substrates of this enzyme accumulate in the non-human model. The tissue or cell extract containing the enzyme substrate is then fractionated by passing the extract through an affinity column. The affinity column comprises an enzyme having similar specificity to the inactive enzyme, bound to a solid support. The affinity resin binds the enzyme substrate so that the substrate may be isolated from other proteins in the extract. The substrate of the enzyme may then be further identified by purifying and sequencing. Also provided by the present invention are novel substrates, and analogs of the substrates identified by the method of the present invention. The novel substrates are then processed and used in the development of therapeutics, such as in gene therapy and vaccines. Also provided by the present invention are receptors that bind to the protein, polypeptide, and peptide substrates of the present invention, and variations of these substrates for use in the development of drugs.(FR) La présente invention concerne un nouveau procédé destiné à l'isolement et à l'identification rapides d'un grand nombre de nouveaux substrats d'enzyme. Le nouveau procédé présenté dans l'invention permet d'identifier des substrats dans des extraits de tissus et/ou de cellules d'un modèle non humain caractérisé par le fait qu'il renferme une enzyme inactive. Sans enzyme active, les substrats de cette enzyme s'accumulent dans le modèle non humain. On fractionne ensuite l'extrait de tissu et/ou de cellules renfermant le substrat d'enzyme en le passant à travers une colonne d'affinité. La colonne d'affinité comporte une enzyme présentant une spécificité similaire à celle de l'enzyme inactive, fixée à un support solide. La résine d'affinité se lie au substrat d'enzyme, de sorte que le substrat peut être isolé d'autres protéines présentes dans l'extrait. Le substrat de l'enzyme peut ensuite être identifié par purification et séquençage. La présente invention concerne également de nouveaux substrats et de nouveaux analogues de substrats identifiés au moyen du procédé de l'invention. Les nouveaux substrats sont ensuite traités et utilisés dans le développement de traitements thérapeutiques, tels qu'en thérapie génique et dans des vaccins. L'invention concerne également des récepteurs se liant à la protéine, des substrats de polypeptides et de peptides, et des variantes de ces substrats destinés au développement de médicaments.