丙酮酸激酶催化糖酵解的最后一步,并且被变构调节以控制通过该途径的通量。提出了两个模型来解释大肠埃希氏大肠杆菌
丙酮酸激酶类型是如何变构调节的:“结构域旋转模型”表明,单体中的结构域和四聚体中的单体都彼此重新定向;“刚性体重新定向模型”仅提出四聚体中单体的重新定向,从而导致活性位点刚性化。为了测试这些假设并阐明驱动构象的构象和动态变化,我们进行了时间分辨电喷雾电离质谱联用氢-
氘交换研究,然后进行了诱变分析以测试激活机制。全球交流实验 在热稳定性研究的支持下,证明
果糖1,,6-二
磷酸结合到变构域会导致向构象的整体动态变化转变。将
氘交换映射到酶内的肽突出显示具有改变的构象动力学的位点特异性区域,其中许多构象灵活性增加。基于这些和诱变研究,我们提出了一种变构机制,据此,
果糖1,6-双
磷酸酯的结合破坏了在单体单元中桥接变构和活性位点域的α-螺旋。这使(beta / alpha)8-桶结构域和负责底物结