氨基甲酸2-
氨基乙基
酯接头(ssH接头)在修饰寡
核苷酸的5'-末端上表现出高活性;但是,ssH接头不适合3'-末端修饰,因为它在
氨水条件下会发生分子内反式酰化反应。我们开发了一种N-(2-
氨基乙基)
氨基甲酸酯连接基(revH连接基),其中
氨基甲酸酯的排列方向相对于
氨基甲酸2-
氨基乙基
酯相反。revH接头对热碱条件具有耐受性,并在与外源分子结合时保持其高反应性。在具有双功能分子的互补双链末端,将3'-revH接头与5'-ssH接头有效连接,从而产生合成的环状结构。通过三链2'-O-
甲基RNA的
化学连接制备了抗microRNA寡
核苷酸(A
MO),具有两个烷基环的A
MO对miRNA功能表现出高抑制活性。revH接头不仅可用于寡
核苷酸的3'末端修饰,而且可与5'-ssH接头结合使用,扩大了应用范围。