[EN] HYBRID ENERGY TRANSFER FOR NUCLEIC ACID DETECTION<br/>[FR] TRANSFERT D'ENERGIE HYBRIDE POUR LA DETECTION D'ACIDE NUCLEIQUE
申请人:UNIV CALIFORNIA
公开号:WO2007103558A2
公开(公告)日:2007-09-13
[EN] Assays using enzymatic degradation of RNA/DNA heteroduplexes are provided for the detection of target nucleic acid molecules. Such enzymatic degradation may be obtained by enzymes including RNaseH. Exemplary methods include Probe Trapping (PT), Hybrid Energy Transfer (HET), and Fluorescent Probe Degradation (FPD). The assays make use of an RNA or chimeric RNA/DNA probe which recognizes a target DNA sequence and forms an RNA/DNA heteroduplex that is the substrate for the enzyme RNaseH which degrades the RNA portion of the probe. Degraded probe fragments diffuse away from the DNA target leading to a detectable signal and allowing the DNA target to hybridize to another probe. Probe degradation is cycled over time. The assays disclosed herein are suitable for use in detecting DNA sequences and could be used in a medical diagnostic.
[FR] La présente invention concerne des dosages utilisant la dégradation enzymatique des hétéroduplexes ARN/ADN pour détecter des molécules d'acide nucléique cibles. Cette dégradation enzymatique peut être obtenue par des enzymes comprenant la RNaseH. Les procédés exemplaires comprennent le piégeage de sonde, le transfert d'énergie hybride et la dégradation de sonde fluorescente. Les dosages utilisent une sonde ARN ou chimérique ARN/ADN qui reconnaît une séquence d'ADN cible et forme un hétéroduplexe ARN/ADN qui constitue le substrat de l'enzyme RNaseH qui dégrade la partie ARN de la sonde. Les fragments de sonde dégradés s'éloignent de la cible d'ADN, ce qui génère un signal détectable et permet à la cible d'ADN de s'hybrider à une autre sonde. La dégradation de la sonde est soumise à un cycle dans le temps. Les dosages faisant l'objet de l'invention conviennent pour une utilisation lors la détection de séquences d'ADN et pourraient être utilisés au cours d'un diagnostic médical.