二次离子质谱(SIMS)通常用于对各种材料的同位素组成进行成像。它在
生物学中变得越来越流行,特别是在细胞代谢研究中。但是,单个蛋白质很难在SIMS中鉴定,这限制了该技术研究单个区室或蛋白质复合物的能力。我们提出了一种基于同位素探针的新型点击反应的特定蛋白质同位素和荧光标记方法(
SPILL)。使用这种方法,我们向不同的蛋白质添加了19个富F标签,并通过NanoSIMS和荧光显微镜对其进行了可视化。在19F信号可在最小背景下精确观察目标蛋白质,并能进行蛋白质分布和细胞代谢或组成的相关研究。
SPILL可以应用于适用于点击
化学的
生物系统,包括大多数
细胞培养系统以及小型模型
生物。