申请人:BOEHRINGER MANNHEIM CORPORATION
公开号:WO1993006487A1
公开(公告)日:1993-04-01
(EN) The invention relates to reagent containing a phenazine-compound and an enzyme with methods for measuring the concentration or detecting the presence of an analyte in a sample. The phenazine-containing compound must be of sufficient type to form a semiquinoid (the color indicator) by reaction involving the enzyme, analyte, and phenazine-containing compound. Importantly, the phenazine-containing compound must be in sufficient amount to correlate the concentration of semiquinoid to the concentration of analyte in the sample or to detect the presence of the analyte in the sample. The reagent may further include a buffer and a surfactant. The reagent may be incorporated into a film and may be provided in kit form. Said methods include spectrophotometric measurement (or detection) of the semiquinoid indicator at wavelengths greater than about 580 nanometers, which reduces interferences due to the presence of hemoglobin, bilirubin, and turbidity. Further, these assay methods involve short incubation periods of less than about one minute for test samples measuring spectrophotometric absorbance for assays performed on solutions and less than about 1.5 minutes for test samples measuring spectrophotometric reflectance or transmittance for assays performed on films.(FR) L'invention concerne un réactif contenant un composé de phénazine et une enzyme, ainsi que des méthodes pour mesurer la concentration ou détecter la présence d'un analyte dans un échantillon. Le composé contenant de la phénazine doit être d'un type suffisant pour former un semi-quinoïde (l'indicateur coloré) par réaction faisant intervenir l'enzyme, l'analyte, et le composé contenant de la phénazine. Il est important que le composé contenant de la phénazine soit en quantité suffisante pour permettre la corrélation de la concentration du semi-quinoïde avec la concentration de l'analyte dans l'échantillon ou bien pour détecter la présence de l'analyte dans l'échantillon. Le réactif peut également comprendre un tampon et un tensioactif. Ce réactif peut être incorporé dans un film et peut se présenter sous forme de trousse. Lesdites méthodes comprennent la mesure (ou la détection) spectrophotométrique de l'indicateur semi-quinoïdique à des longueurs d'onde supérieures à environ 580 nanomètres, ce qui réduit les interférences dues à la présence d'hémoglobine, de bilirubine, et la turbidité. Par ailleurs, ces méthodes de dosage portent sur des périodes d'incubation courtes inférieures à environ une minute pour des échantillons d'essai mesurant l'absorption spectrophotométrique lors de dosages effectués sur des solutions et inférieures à environ 1,5 minute pour des échantillons d'essai mesurant le pourcentage de réflexion ou de transmission spectrophotométriques lors de dosages réalisés sur des films.