摘要:
这项研究的目的是表征N 2 O 3对经典氨基酸的亚硝化作用。氨基酸亚硝化会形成主要为α-羟基的酸,这些酸适用于等度HPLC分析以及随后对生物样品中氨基酸的定量。该方法特别适用于检测例如发酵培养基中的氨基酸,因为α-羟基酸可以与多种其他有机底物和产物平行进行定量。氨基酸在酸性KNO 2中转化为相应的α-羟基酸解决方案。通过添加NaOH终止反应,并通过等度HPLC分离α-羟基酸,并通过折射率或UV吸收检测进行定量。对18种经典氨基酸进行亚硝化;甘氨酸,大号丙氨酸,大号-缬氨酸,大号l-亮氨酸,大号-异亮氨酸,大号-甲硫氨酸,大号-丝氨酸,大号-苏氨酸,大号天冬酰胺,大号谷氨酰胺,大号天冬氨酸,大号谷氨酸,大号-脯氨酸,L-半胱氨酸,L-苯丙氨酸,L-赖氨酸,L-酪氨酸和L-色氨酸形成可检测的亚硝化产物。然而,L-赖氨酸需要在96 mM甲酸中孵育才能产生可检测的产物,而L-苯丙氨酸必须在120