来自莫原链霉菌(mTG)的微
生物转谷
氨酰胺酶由于其能够使谷
氨酰胺和
伯胺的侧链交联而成为一种有用的
生物技术工具。迄今为止,尚未完全了解mTG的底物特异性,这在将mTG用于解决新型靶标时提出了明显的挑战。为此,需要一种可行的策略来提供量身定制的转谷
氨酰胺酶。这项工作报告了一种基于酵母表面展示和荧光激活细胞分选(FACS)的超高通量筛选方法,该方法使微
生物转谷
氨酰胺酶向增强活性的方向进化。进行五轮FACS筛选,然后在大肠杆菌中
重组表达最有效的变体产生的变体与野生型酶相比,与工程改造的治疗性抗HER2
抗体结合后具有改善的酶促性能和标记行为。这个强大且普遍适用的平台能够调整mTG的催化效率。