含有s-
三嗪环的生长底物通常被细菌代谢,通过中间体
氰尿酸释放3摩尔的
氨。在25年的时间里,许多原始研究论文和评论都指出,
氰尿酸分两步代谢为2-氮中间体
尿素。在本研究中,在所有检查的细菌中,
脲基
甲酸酯而不是
尿素被证明是
氰尿酸代谢中的2-氮中间体。六个不同的实验结果支持了这一结论:(i)在以前的研究中使用的酸性萃取和色谱法条件下,合成的
脲基
甲酸酯显示易于脱羧形成
尿素;(ii)使用碱性提取方法稳定和检测活跃代谢
氰尿酸的细菌中的
脲基
甲酸酯;(iii)
脲基
甲酸酯形成和消失的动力学过程与其在
氰尿酸代谢中的中间体一致,并且在那些实验中未观察到
尿素;(iv)在
氰尿酸上生长的细胞中的蛋白质
提取物具有
脲基
甲酸酯
水解酶活性;(v)在几种
氰尿酸代谢细菌中发现了分别编码产生和
水解
脲基
甲酸酯的编码AtzE和AtzF酶的
基因;(vi)TrzF是在阴沟肠杆菌菌株99中发现的AtzF同源物,被克隆并在大肠杆菌中表达,并显示