N-(4-chloro-2-methylbenzyl)-N-(4-chlorobenzyl)-1-(5-nitrothiophen-2-yl)methanamine | 1438071-12-5

• 分子结构分类: 有机化合物 - 有机杂环化合物 - 噻吩类
• 英文名称: N-(4-chloro-2-methylbenzyl)-N-(4-chlorobenzyl)-1-(5-nitrothiophen-2-yl)methanamine
• 英文别名: GSK2945；N-[(4-chloro-2-methylphenyl)methyl]-1-(4-chlorophenyl)-N-[(5-nitrothiophen-2-yl)methyl]methanamine
• CAS: 1438071-12-5
• 化学式: C₂₀H₁₈Cl₂N₂O₂S
• 分子量: 421.347
• InChiKey: NXCSEAQOKPSNJV-UHFFFAOYSA-N

物化性质

• 沸点：
  525.0±45.0 °C(Predicted)
• 密度：
  1.363±0.06 g/cm3(Predicted)
• 溶解度：
  可溶于乙腈（轻微）、DMSO（轻微、加热）、甲醇（轻微、超声处理）

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  6.2
• 重原子数：
  27
• 可旋转键数：
  6
• 环数：
  3.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.2
• 拓扑面积：
  77.3
• 氢给体数：
  0
• 氢受体数：
  4

制备方法与用途

生物活性

GSK2945 是一种叔胺，是一种高度特异性的 Rev-erbα/REV-ERBα 拮抗剂，其 EC50 值分别为 21.5 μM 和 20.8 μM。GSK2945 可增强胆固醇 7α-羟化酶 (CYP7A1) 的水平和胆固醇代谢。

体外研究

GSK2945 在剂量依赖性地增强 Rev-erbα 的转录活性以及其靶基因 Bmal1 的 luciferase 报告（EC50 值为 2.05 μM）。在小鼠和人类原代肝细胞中，20 μM 浓度的 GSK2945 处理后可以增加 Cyp7a1/CYP7A1 的水平。此外，GSK2945 (20 μM) 还会增加 Lrh-1/LRH-1 (Cyp7a1/CYP7A1 的已知肝细胞激活剂) 的 mRNA 和蛋白质表达。

RT-PCR 结果

细胞系	小鼠（雄性，CD1）和人类（雄性，白种人）原代肝细胞
浓度	20 μM
培养时间	12小时和24小时
结果	在24小时时显著增加了 Cyp7a1 的 mRNA 和蛋白质表达。在人类原代肝细胞中，CYP7A1 的 mRNA 和蛋白质水平升高，Lrh-1/LRH-1 上调。

体内研究

在雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）中，通过腹腔注射给予 GSK2945 (0-10 mg/kg；每天两次；连续7天) 可以增加肝胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 水平并降低血液中的总胆固醇。

实验结果

动物模型	雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）
用药	0 mg/kg 或 10 mg/kg
给药方式	腹腔注射；每天两次；连续7天
结果	提高了肝脏胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 水平并降低了血液中总胆固醇。

反应信息

• 作为产物：
  描述：

  5-硝基噻吩-2-甲醛 、 N-[(4-chloro-2-methylphenyl)methyl]-1-(4-chlorophenyl)methanamine 在 三乙酰氧基硼氢化钠 、 溶剂黄146 作用下， 以 1,2-二氯乙烷 为溶剂， 生成 N-(4-chloro-2-methylbenzyl)-N-(4-chlorobenzyl)-1-(5-nitrothiophen-2-yl)methanamine
  参考文献：
  名称：

  REV-ERBα Regulates CYP7A1 Through Repression of Liver Receptor Homolog-1

  摘要：

  核血红素受体逆成红细胞增多症病毒 (REV-ERB) α（一种转录抑制因子）已知可调节胆固醇 7 α-羟化酶 (CYP7A1) 和胆汁酸合成。然而，REV-ERB α 调节 CYP7A1 的机制仍不清楚。在这里，我们研究了 LRH-1 在 REV-ERB α 调节 CYP7A1 和胆固醇代谢中的作用。我们首先将叔胺 N-(4-氯-2-甲基苄基)-N-(4-氯苄基)-1-(5-硝基噻吩-2-基)甲胺 (GSK2945) 表征为高度特异性的 Rev-erb α / REV-ERB α 拮抗剂使用基于细胞的测定法证实了 Rev-erb α 在小鼠肝脏中的表达。 GSK2945 治疗可增加野生型小鼠肝脏胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 水平并降低血浆胆固醇。同样，该化合物增加了高胆固醇血症小鼠 Cyp7a1 的表达和微粒体活性。这与血浆和肝脏胆固醇的降低以及胆汁酸的产生增加相一致。 GSK2945 处理后，小鼠和人类原代肝细胞中 Cyp7a1/CYP7A1 水平也有所增加。在这些实验中，我们观察到 Lrh-1/LRH-1（一种已知的 Cyp7a1/CYP7A1 肝脏激活剂）mRNA 和蛋白质平行增加。荧光素酶报告基因、迁移率变化和染色质免疫沉淀分析表明，Lrh-1/LRH-1 是 Rev-erb α /REV-ERB α 的直接靶基因。此外，肝脏中 Lrh-1 的条件性缺失消除了 Rev-erb α 对小鼠 Cyp7a1 和胆固醇代谢的调节作用。总之，Rev-erb α 通过抑制 Lrh-1 受体来调节 Cyp7a1 和胆固醇代谢。靶向 REV-ERB α /LRH-1 轴可能代表一种治疗胆固醇相关疾病的新方法。

  DOI：

  10.1124/dmd.117.078105

文献信息

• Optimized Chemical Probes for REV-ERBα
  作者：Ryan P. Trump、Stefano Bresciani、Anthony W. J. Cooper、James P. Tellam、Justyna Wojno、John Blaikley、Lisa A. Orband-Miller、Jennifer A. Kashatus、Mohamed Boudjelal、Helen C. Dawson、Andrew Loudon、David Ray、Daniel Grant、Stuart N. Farrow、Timothy M. Willson、Nicholas C. O. Tomkinson

  DOI：10.1021/jm400458q

  日期：2013.6.13

  REV-ERB alpha has emerged as an important target for regulation of circadian rhythm and its associated physiology. Herein, we report on the optimization of a series of REV-ERB alpha agonists based on G5K4112 (1) for potency, selectivity, and bioavailability.(1) Potent REV-ERB alpha agonists 4, 10, 16, and 23 are detailed for their ability to suppress BMAL and IL-6 expression from human cells while also demonstrating excellent selectivity over LAR alpha. Amine 4 demonstrated in vivo bioavailability after either iv or oral dosing.
• REV-ERB<i>α</i> Regulates CYP7A1 Through Repression of Liver Receptor Homolog-1
  作者：Tianpeng Zhang、Mengjing Zhao、Danyi Lu、Shuai Wang、Fangjun Yu、Lianxia Guo、Shijun Wen、Baojian Wu

  DOI：10.1124/dmd.117.078105

  日期：2018.3

  Nuclear heme receptor reverse erythroblastosis virus (REV-ERB) α (a transcriptional repressor) is known to regulate cholesterol 7 α -hydroxylase (CYP7A1) and bile acid synthesis. However, the mechanism for REV-ERB α regulation of CYP7A1 remains elusive. Here, we investigate the role of LRH-1 in REV-ERB α regulation of CYP7A1 and cholesterol metabolism. We first characterized the tertiary amine N -(4-chloro-2-methylbenzyl)- N -(4-chlorobenzyl)-1-(5-nitrothiophen-2-yl)methanamine (GSK2945) as a highly specific Rev-erb α /REV-ERB α antagonist using cell-based assays and confirmed expression of Rev-erb α in mouse liver. GSK2945 treatment increased hepatic mouse cholesterol 7 α -hydroxylase (Cyp7a1) level and lowered plasma cholesterol in wild-type mice. Likewise, the compound increased the expression and microsomal activity of Cyp7a1 in hypercholesterolemic mice. This coincided with reduced plasma and liver cholesterol and enhanced production of bile acids. Increased levels of Cyp7a1/CYP7A1 were also found in mouse and human primary hepatocytes after GSK2945 treatment. In these experiments, we observed parallel increases in Lrh-1/LRH-1 (a known hepatic activator of Cyp7a1/CYP7A1) mRNA and protein. Luciferase reporter, mobility shift, and chromatin immunoprecipitation assays revealed that Lrh-1/LRH-1 was a direct Rev-erb α /REV-ERB α target gene. Furthermore, conditional deletion of Lrh-1 in the liver abrogated the regulatory effects of Rev-erb α on Cyp7a1 and cholesterol metabolism in mice. In conclusion, Rev-erb α regulates Cyp7a1 and cholesterol metabolism through its repression of the Lrh-1 receptor. Targeting the REV-ERB α /LRH-1 axis may represent a novel approach for management of cholesterol-related diseases.

  核血红素受体逆成红细胞增多症病毒 (REV-ERB) α（一种转录抑制因子）已知可调节胆固醇 7 α-羟化酶 (CYP7A1) 和胆汁酸合成。然而，REV-ERB α 调节 CYP7A1 的机制仍不清楚。在这里，我们研究了 LRH-1 在 REV-ERB α 调节 CYP7A1 和胆固醇代谢中的作用。我们首先将叔胺 N-(4-氯-2-甲基苄基)-N-(4-氯苄基)-1-(5-硝基噻吩-2-基)甲胺 (GSK2945) 表征为高度特异性的 Rev-erb α / REV-ERB α 拮抗剂使用基于细胞的测定法证实了 Rev-erb α 在小鼠肝脏中的表达。 GSK2945 治疗可增加野生型小鼠肝脏胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 水平并降低血浆胆固醇。同样，该化合物增加了高胆固醇血症小鼠 Cyp7a1 的表达和微粒体活性。这与血浆和肝脏胆固醇的降低以及胆汁酸的产生增加相一致。 GSK2945 处理后，小鼠和人类原代肝细胞中 Cyp7a1/CYP7A1 水平也有所增加。在这些实验中，我们观察到 Lrh-1/LRH-1（一种已知的 Cyp7a1/CYP7A1 肝脏激活剂）mRNA 和蛋白质平行增加。荧光素酶报告基因、迁移率变化和染色质免疫沉淀分析表明，Lrh-1/LRH-1 是 Rev-erb α /REV-ERB α 的直接靶基因。此外，肝脏中 Lrh-1 的条件性缺失消除了 Rev-erb α 对小鼠 Cyp7a1 和胆固醇代谢的调节作用。总之，Rev-erb α 通过抑制 Lrh-1 受体来调节 Cyp7a1 和胆固醇代谢。靶向 REV-ERB α /LRH-1 轴可能代表一种治疗胆固醇相关疾病的新方法。