摘要:
叠氮化物和炔烃之间的 1,3-偶极 [3 + 2] 环加成 - 一种原型“点击”化学 - 已越来越多地用于核酸的功能化。铜 (I) 催化的炔标记 DNA 分子和叠氮化物之间的 1,3-偶极环加成反应效果很好,但它们需要优化多种试剂,并且已知铜离子介导 DNA 裂解。对于许多应用,最好从这些反应中消除 Cu(I) 催化剂。在这里,我们描述了 5'-二苯并环辛炔 (DIBO) 修饰的寡核苷酸的固相合成和表征,使用新的 DIBO 亚磷酰胺,通过无铜、应变促进的炔-叠氮环加成 (SPAAC) 与叠氮化物反应。我们发现 DIBO 基团不仅能经受住固相寡核苷酸合成 (SPOS) 的标准酸性和氧化反应,而且还能经受住聚合酶链反应 (PCR) 的热循环和标准条件。因此,使用 DIBO 修饰的引物进行 PCR 产生了“可点击”的扩增子,这些扩增子可以用叠氮化物修饰的荧光团标记或固定在叠氮化物修饰的表面上。鉴于其简单性,DNA