摘要:
活细胞中基于化学的蛋白质标记无疑有助于理解天然蛋白质功能和生物/制药应用。在这里,我们报告了一种用于体外和活细胞条件下的内源性膜结合蛋白标记的新方法。由配体结合亲和力(配体定向 AI (LDAI))化学辅助的中等反应性烷氧基酰基咪唑 (AI) 使我们能够选择性地修饰天然蛋白质,例如二氢叶酸还原酶 (DHFR) 和叶酸受体 (FR),这两者都不能使用最近开发的配体导向的甲苯磺酸盐方法进行有效标记。很明显,LDAI 选择性地标记了 DHFR 中靠近配体结合袋的单个 Lys(K32)。我们还证明了荧光素标记的(内源性、