抗体的位点特异性标记和偶联对于基础研究和开发更有效的诊断和治疗方法是非常需要的。我们在这里报告了一种通用且稳健的
化学酶法,该方法允许对
抗体进行一锅式位点特异性功能化。设计、合成和评估了一系列选择性修饰的二糖
恶唑啉衍
生物,作为
抗体 Fc 聚糖重塑的不同内切糖苷酶的供体底物。我们发现,在测试的几种内切糖苷酶中,来自化脓性链球菌的野生型内切糖苷酶血清型
M49 (Endo-S2) 在将带有位点选择性修饰的
叠氮化物、
生物素或荧光标签的功能化二糖转移到
抗体而不
水解产生的转糖基产物方面表现出显着的活性。这一发现连同 Endo-S2 对
重组抗体的出色 Fc 去糖基化活性,允许以一锅法直接标记和功能化
抗体,无需中间体和酶分离。位点特异性引入不同数量的
叠氮基团使得能够高效合成均相
抗体-药物偶联物 (ADC),并通过无
铜方法精确控制药物
抗体比 (
DAR) 在 2 到 12 之间应变促进的点击反应。细胞活力测定表明,与具有较低