Lignin-derived aryl methyl ethers (e.g. coniferylalcohol, ferulicacid) are expected to be a future carbon source for chemistry. The well-known P450 dependent biocatalytic O-demethylation of these aryl methyl ethers is prone to side product formation especially for the oxidation sensitive catechol products which get easily oxidized in the presence of O2. Alternatively, biocatalytic demethylation using
木质素衍生的芳基甲基醚(例如针叶醇、阿魏酸)有望成为未来的化学碳源。众所周知的这些芳基甲基醚的 P450 依赖性生物催化 O 去甲基化容易形成副产物,特别是对于在 O2 存在下容易氧化的氧化敏感的邻苯二酚产物。或者,可以在厌氧条件下使用钴胺依赖性酶进行生物催化去甲基化,其中需要两种蛋白质,即甲基转移酶和载体蛋白。为了使这种方法适用于制备转化,设计了融合蛋白,通过可变甘氨酸接头将钴胺依赖性甲基转移酶 (MT) 与来自哈夫尼斯脱硫杆菌的类蛋白结合蛋白 (CP) 连接起来。从产生的蛋白质来看,具有最短接头的融合酶 MT-L5-CP 在研究的所有融合酶中表现最好,显示出与分离的蛋白质相当甚至更好的性能。融合酶具有多种优势,例如可以跳过 CP 最初所需的钴胺素辅因子上样步骤,从而大大简化了方案。因此,使用 Schlenk 条件进行生物催化去甲基化,允许 O 去甲基化,例如在 25 mL 比例上对单木质素针叶醇进行