在
生物分子上引入多种标记是一个挑战。我们在此报告
乙烯基砜衍生的带有
生物素和荧光标签的双功能标签单连接点试剂(BT
SAP)的合成及其在蛋白质中的应用,以通过亲电
乙烯基砜的迈克尔型加成引入多个标签团体。这些BT
SAP试剂可通过两步
化学策略轻松合成,该策略涉及
炔烃乙烯砜衍生标签(AVST)的制备以及第二
叠氮化物功能化标签的随后点击Cu
AAC附着。BT
SAP试剂与低反应蛋白
辣根过氧化物酶(HRP)的直接偶联将其转变为双重报告基团(即荧光和
过氧化物酶活性),可以通过
生物素-亲和素亲和力与任何识别系统偶联。可点击的自报告化合物,通过
乙烯基砜基团偶联后,可同时在蛋白质中引入
炔烃功能并进行标记。在基于Cu
AAC的顺序方法中实施这些可点击的AVST化合物也可以实现HRP的双重标记。与通过BT
SAP试剂进行直接双功能标记相比,此方法在荧光标记,比活和
生物素标签的功能性方面产生同等的结果。但是,对于生命科学而言