摘要:
沙门氏菌含有注释为几丁质酶的基因。然而,它们的几丁质分解活性从未得到证实。现在,我们证明了针对分配给鼠伤寒沙门氏菌SL1344中SL0018(chiA)基因编码的糖苷水解酶家族18的几丁质酶的这种活性。通过PCR扩增缺乏假定的几丁质结合域的chiA的C末端截短形式,克隆并在具有N末端(His)6标签的大肠杆菌BL21(DE3)中表达。纯化的酶水解4-硝基苯基N,N'-二乙酰基-β- d-壳聚糖,4-硝基苯基β- d - N,Ñ ',Ñ “-triacetylchitotriose和羧甲基甲壳素雷玛唑亮紫但不作用4-硝基苯基ñ -乙酰基β- d -glucosaminide,肽聚糖或4-硝基苯基β- d -cellobioside。酶活性的特征还在于使用1 H核磁共振直接监测产物的形成,这表明几丁质是释放N,N'-二乙酰基壳二糖的底物。水解在保留构型的情况下发生,并且该酶仅作用于壳寡糖底物的