摘要:
作为扩大遗传字母表努力的一部分,我们检查了带有六种不同非天然核苷酸的 DNA 合成,这些核苷酸带有甲氧基衍生的核碱基类似物。不同的核碱基取代模式被用来系统地改变核碱基电子学、空间和氢键势。我们确定了大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 Klenow 片段在稳态条件下合成和扩展不同非天然碱基对和错误配对的能力。与过去检测的其他氢键受体不同,甲氧基不会促进错配,这意味着它们不会被天然核碱基的任何氢键供体识别;但是,它们确实有助于复制。更有效的复制主要是由于引物在非天然碱基对处终止的延伸率增加,有趣的是,需要甲氧基在其位于发育中的小沟的邻位,并且可以形成功能性的与聚合酶形成重要的氢键。因此,邻甲氧基对于扩大遗传字母表的努力通常是有用的。