2',7'-Bis-(2-carboxyethyl)-6-carboxyfluorescein | 85138-49-4

• 分子结构分类: 有机化合物 - 有机杂环化合物 - 苯并吡喃
• 英文名称: 2',7'-Bis-(2-carboxyethyl)-6-carboxyfluorescein
• 英文别名: 2-[2,7-bis(2-carboxyethyl)-3-hydroxy-6-oxoxanthen-9-yl]terephthalic acid
• CAS: 85138-49-4
• 化学式: C₂₇H₂₀O₁₁
• 分子量: 520.4
• InChiKey: DKROGDOAOXDINY-UHFFFAOYSA-N

物化性质

• 溶解度：
  DMF：5mg/mL； DMSO：15mg/mL； DMSO:PBS (pH 7.2) (1:2)：0.25 mg/ml；乙醇：5mg/mL
• 稳定性/保质期：

  按规定使用和贮存的物质不会分解，避免与氧化物接触。

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  1.5
• 重原子数：
  38
• 可旋转键数：
  9
• 环数：
  4.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.15
• 拓扑面积：
  196
• 氢给体数：
  5
• 氢受体数：
  11

安全信息

• 危险品标志：
  Xn
• 安全说明：
  S22,S24/25
• 危险类别码：
  R20/21/22,R36/37/38

制备方法与用途

生物活性

BCECF 是一种对 pH 敏感的荧光染料，可用于监测细胞内的 pH 比值。它可以在生理 pH 值范围 6.0-8.0 内进行测量。激发波长为 490/440 nm，发射强度为 535 nm。

体外研究

完全处理的细胞显示出含有电子密集沉积物的氢泡，这些沉积物在一定程度上聚集。有时候，在氢泡的内部可以观察到染色现象。值得注意的是，阴离子载体尼格菌素（nigericin）不会抑制 BCECF 在氢泡中的装载。

以下是使用 BCECF 进行体外研究的操作步骤：

1. 准备 2 至 20 mM 的 BCECF 肉桂油溶液。
2. 准备 5-50 µM 的 BCECF 染色液，将其加入缓冲溶液（如 HHBS 或 PBS）中。
3. 将 1000 µL/孔（6 孔板）、100 µL/孔（96 孔板）或 25 µL/孔（384 孔板）的 BCECF 染色液加入细胞培养板中。
4. 在细胞孵育器中孵育染色板，时间约为 30-60 分钟。
5. 清洗并更换染色溶液为缓冲溶液。
6. 使用发射激发比 E_x/E_m = 490/535 nm 或 430/535 nm 进行 pH 测定。