作者:Ichiro Hirao、Yoko Harada、Michiko Kimoto、Tsuneo Mitsui、Tsuyoshi Fujiwara、Shigeyuki Yokoyama
DOI:10.1021/ja047201d
日期:2004.10.1
Toward the site-specific incorporation of amino acid analogues into proteins, a two-unnatural-base-pair system was developed for coupled transcription-translation systems with the expanded genetic code. A previously designed unnatural base pair between 2-amino-6-(2-thienyl)purine (denoted by s) and pyridin-2-one (denoted by y) was used for the site-specific incorporation of yTP into RNA opposite s
为了将氨基酸类似物定点掺入蛋白质中,开发了一种双非天然碱基对系统,用于具有扩展遗传密码的耦合转录-翻译系统。之前设计的 2-amino-6-(2-thienyl)purine(用 s 表示)和 pyridin-2-one(用 y 表示)之间的非天然碱基对用于将 yTP 位点特异性地掺入到与 s 相对的 RNA 中。 T7 RNA聚合酶模板。为了将 sTP 位点特异性地掺入 RNA,新开发的非天然碱基 imidazolin-2-one(由 z 表示)优于 y 作为模板碱基,用于与 T7 转录中的 s 配对。sy 和 sz 对的组合提供了一个强大的工具来制备含 y 的 mRNA 和含 s 的 tRNA,用于高效的偶联转录-翻译系统,其中遗传密码通过由 sy 对介导的密码子-反密码子相互作用进行扩展。此外,s 的核苷具有很强的荧光性,因此 sz 对能够对 RNA 分子进行位点特异性荧光标记。这些