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alkaline phosphatase | 9001-78-9

中文名称
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中文别名
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英文名称
alkaline phosphatase
英文别名
alkaline phosphomonoesterase;phosphomonoesterase;glycerophosphatase;alkaline phosphohydrolase;alkaline phenyl phosphatase;orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum);enzyme alkaline phosphatase
CAS
9001-78-9
化学式
mdl
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分子量
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InChiKey
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BEILSTEIN
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EINECS
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  • 物化性质
  • 计算性质
  • ADMET
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  • SDS
  • 制备方法与用途
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物化性质

  • 密度:
    1.12 g/mL at 20 °C

安全信息

  • TSCA:
    Yes
  • 危险品标志:
    B,Xi
  • 安全说明:
    S22,S23,S24/25,S26,S36
  • 危险类别码:
    R36/37/38
  • WGK Germany:
    3
  • 海关编码:
    35079090

制备方法与用途

碱性磷酸酶简介

碱性磷酸酶(英语:Alkaline phosphatase,简称ALP或ALKP)(EC 3.1.3.1)是一类水解酶,在碱性环境下最为有效,能够从核苷酸、蛋白质、生物碱等分子上去除磷酸基团,进行去磷酸化作用。

作用

作为成骨细胞的一种外酶,碱性磷酸酶的表达活性是成骨细胞分化的一个明显特征。其主要生理功能是在成骨过程中水解磷酸酯,为羟基磷灰石的沉积提供必要的磷酸,并通过水解焦磷酸盐解除其对骨盐形成的抑制作用,有利于成骨过程。

用途

碱性磷酸酶对醇、胺、焦磷酸盐和酚的磷酸酯具有广泛的特异性,需要锌和镁或钙二价离子来维持活性。它可以用于使酪蛋白和其他蛋白质去磷酸化;也可用于使DNA或RNA的5'-末端去磷酸化以防止自身连接。在用其去磷酸化后,DNA或RNA也可以用放射性标记的磷酸盐(通过T4多核苷酸激酶)进行标记。它还常用于与抗体和其他蛋白质缀合,应用于ELISA、Western印迹和组织化学检测;当需要高灵敏度时,可用于蛋白质标记。

生理特性

碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基。该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。作为磷酸酶的一种,其作用与激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子如ATP将磷酸基团加到相应底物分子上。

碱性磷酸酶在碱性环境中具有最大活力,来源于细菌的ALP最适pH为8.0,而牛源ALP则为8.5。

化学性质

碱性磷酸酶以白色冻干粉或3.2mol/L硫酸铵悬浮液的形式存在,易溶于水和稀缓冲液,pI值为5.7。最适pH值在8.0-10.5之间(视底物而定)。悬浮液于4℃保存6个月活性不变;冻干粉在氯化钙真空干燥器中于0℃保存一年,活力损失约40%。

抑制剂包括二价金属离子螯合剂(EDTA、草酸盐、半胱氨酸、组氨酸、柠檬酸)、一乙醇胺、无机磷、Be2+、芳香族氨基酸、尿素、碘乙酰胺和L-高精氨酸,以及Zn2+的高浓度。激活剂包括Tris缓冲液、低浓度的Zn2+、氨基醇(2-氨基-2-甲基-1-丙醇、二乙醇胺)及Mg2+、Co2+、Mn2+。1%水溶液在278nm处的吸光系数为7.6。

酶反应:4-硝基苯磷酸盐 + H2O → 4-硝基苯酚 + 无机磷。

用途

碱性磷酸酯酶适用于生化研究,并常用于酶免疫测定技术的标记,医学上常用作诊断酶。

生产方法

以小牛小肠黏膜为原料,经匀浆、过滤后酸沉淀,再用正丁醇抽提、乙醚和丙酮沉淀,最后经过活性炭处理精制而得碱性磷酸酶。

反应信息

  • 作为试剂:
    描述:
    alkaline phosphatase 作用下, 以 aq. phosphate buffer 为溶剂, 反应 4.0h, 生成
    参考文献:
    名称:
    基于肽的超分子水凝胶可控制胺药物的递送
    摘要:
    超分子水凝胶在控制药物输送方面具有广阔的前景。在本文中,我们报道了基于带有末端醛的肽的超分子水凝胶。水凝胶是通过酶指导自组装(EISA)过程制备的,所得水凝胶在高酸性或碱性水溶液中显示出超稳定的性能。水凝胶化剂可以与胺类药物形成席夫碱。由于席夫碱具有pH响应特性,因此水凝胶可用于控制释放的胶囊化胺类药物。我们的研究提供了一种可用于受控药物输送的基于肽的水凝胶。
    DOI:
    10.1002/asia.201800708
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