[DE] VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON ERYTHROPOIETIN FREI VON TIERISCHEN PROTEINEN<br/>[EN] PROCESS FOR PRODUCING ERYTHROPOIETIN CONTAINING NO ANIMAL PROTEINS<br/>[FR] PROCEDE DE PRODUCTION D'ERYTROPOIETINE EXEMPTE DE PROTEINES ANIMALES
申请人:BOEHRINGER MANNHEIM GMBH
公开号:WO1996035718A1
公开(公告)日:1996-11-14
(DE) Präparat eines Proteins mit Erythropoietinaktivität, erhältlich nach Kultivierung einer Wirtszelle, welche Erythropoietin produziert, gekennzeichnet durch a) einen Gehalt von Proteinen, die aus der Wirtszelle stammen, von « 100 ppm, b) einen Gehalt von DNA aus der Wirtszelle von « 10 pg/83 $g(m)g Erythropoietin und dadurch, daß c) das Präparat vollständig frei von Säugerproteinen ist, die nicht aus der Wirtszelle stammen, wird nach serumfreier Kultur durch ein Aufreinigungsverfahren aus Farbstoffchromatographie, hydrophobe Chromatographie an einem alkylierten oder arylierten Träger, Chromatographie an Hydroxyapatit, hydrophobe Chromatographie und Anionenaustauscherchromatographie erhalten.(EN) A preparation of a protein with erythropoietin activity and obtainable after culturing an erythropoietin-producing host cell is characterised by a) a host-cell proteins content of $m(F) 100 ppm, b) a host cell DNA content of $m(F) 10 pg per 83 $g(m)g of erythropoietin, and c) a total absence of mammalian proteins not derived from the host cell. The preparation is obtained following serum-free culture using a purification process involving dye chromatography, hydrophobic chromatography on an alkylated or arylated carrier, chromatography on hydroxyapatite, hydrophobic chromatography and anion exchange chromatography.(FR) Une préparation d'une protéine présentant l'activité de l'érythropoïétine et pouvant être obtenue après la mise en culture d'une cellule hôte produisant de l'érythropoïétine se caractérise par: a) une teneur en protéines provenant de la cellule hôte de « 100 ppm, b) une teneur en ADN provenant de la cellule hôte de « 10 pg/83 $g(m)g d'érythropoïétine, et c) une absence totale de protéines de mammifère ne provenant pas de la cellule hôte. Cette préparation est obtenue après la culture sans sérum selon un procédé de purification impliquant une chromatographie sur colorant, une chromatographie hydrophobe sur un porteur alkylé ou arylé, une chromatographie sur hydroxyapatite, une chromatographie hydrophobe et une chromatographie sur échangeur d'anions.
一种含促红细胞生成素活性的蛋白质制剂,可获得自培养的具有促红细胞生成素活性的宿主细胞,该宿主细胞能分泌促红细胞生成素,该制剂的特性包括:a) 来自宿主细胞的蛋白质含量为 $m(F) 100 ppm;b) 来自宿主细胞的DNA含量为 $m(F) 10 pg/83 $g(m)g 的促红细胞生成素;c) 所有的非宿主细胞来源的哺乳动物蛋白均被完全去除。通过色谱法(包括色谱色谱法、疏
水色谱以及带有有机基团或 ary 群的载体上的疏
水色谱、
羟基磷灰石上色谱法和离子交换色谱法)对没有血清的宿主细胞进行培养后获得的。