N-acyl-aliphatic-L-amino acid amidohydrolase | 9012-37-7

• 物质功能分类: 生物化工 - 酶及辅酶类
• 分子结构分类: 水解酶 - 作用于除肽键之外的碳-氮键 - 在线性酰胺中
• 英文名称: N-acyl-aliphatic-L-amino acid amidohydrolase
• 英文别名: aminoacylase 1；aminoacylase I；dehydropeptidase II；histozyme；hippuricase；benzamidase；acylase I；hippurase；amido acid deacylase；L-aminoacylase；acylase；aminoacylase；L-amino-acid acylase；alpha-N-acylaminoacid hydrolase；long acyl amidoacylase；short acyl amidoacylase；ACY1 (gene name)；N-acyl-L-amino-acid amidohydrolase；glutaryl acylase (immobilized on polyethyleneimine)
• CAS: 9012-37-7

安全信息

• 危险品运输编号：
  NONH for all modes of transport
• WGK Germany：
  3
• 安全说明：
  SR22

制备方法与用途

化学性质

该物质为浅红色或浅黄色冻干粉，易溶于水。其最适pH值范围为7.0至7.5（猪肾淀粉酶）或7至8（米曲霉）。稳定性方面，纯酶冻干后可以长期保存而不失活；粗酶溶液中加入甲苯后可在冰箱中短期存放1至2天；在5℃条件下，粗酶制剂可保持稳定；pH值为7时，在70℃下水溶液中的酶活性60分钟内无变化；而pH值小于5时，则在70℃下迅速失活。对底物化学结构的要求主要涉及单羧基氨基酸。不同的酰化基团会导致水解速度的不同，且不同来源的酶对底物化学结构的专一性也会有所不同。

用途

该物质用于分离D-型和L-型氨基酸。

生产方法

以猪肾、淀粉酶或米曲霉作为原料，经匀浆处理并离心去除沉淀物后，使用硫酸铵进行分级沉淀。通过水透析和离心步骤获得粗酶液，再分别用丙酮和乙醇进行分级沉淀，并利用DEAE-纤维素柱层析进行纯化，最终得到成品。

反应信息

• 作为试剂：
  描述：

  头孢菌素 C 在 D-amino acid oxidase (immobilized on glyoxyl agarose) 、 N-acyl-aliphatic-L-amino acid amidohydrolase sodium hydroxide 、 氧气 作用下， 以 phosphate buffer 为溶剂， 反应 3.83h， 生成 戊二酸 、 alkaline earth salt of/the/ methylsulfuric acid
  参考文献：
  名称：

  在没有过氧化氢的情况下将头孢菌素C一锅转化为7-氨基头孢烷酸

  摘要：

  在工业水平上生产7-氨基头孢烷酸（7-ACA）的主要缺点是由于反应过程中过氧化氢的存在而使该过程中涉及的酶失活。作为替代方案，我们开发了在单个反应器中在反应过程中不存在过氧化氢的情况下将头孢菌素C转化为7-ACA的方法，可实现80％以上的收率。为了发展这一过程，将D-氨基酸氧化酶（DAAO）与过氧化氢酶（CAT）共固定，该酶能够在原位完全消除相邻的DAAO分子形成的过氧化氢。因此，反应产物仅是α-酮己二基-7-ACA。该系统防止过氧化氢使氧化酶失活，从而解决了酶促过程的主要问题。此外，我们发现，只要反应介质中不存在戊二酸（因为它能够抑制水解），α-酮己二基-7-ACA就会被戊二酰酰基化酶（GAC）识别为底物并被水解。α-酮己二基-7-ACA的低稳定性证明了使用单个反应器的合理性，其中在生成该底物时已存在戊二酰酰基化酶。因此，整个过程可以（并且必须）在单个步骤中进行，并且在没有过氧化氢的情况下可能影响所涉及酶的稳定性。

  DOI：

  10.1002/adsc.200505099