本品是从动物软骨组织中得到的酸性黏多糖,为灰白色无定型粉末,略带咸味;无臭;具有引湿性;水溶液具黏稠性,加热不凝结。在水中易溶,在乙醇、丙酮或冰醋酸中不溶解。
制剂 方法一:稀碱-浓盐提取法浸出与提取:将洁白干净的碎软骨置于提取罐内,加3-3.5mol/L氯化钠溶液使骨渣完全浸没。用50%氢氧化钠液调pH至12-13,搅拌提取10-15小时,过滤,滤渣重提一次。
盐酸盐解:将提取液用2mol/L盐酸调pH为7-8,迅速升温至80-90℃,保温20分钟,冷却后过滤。
除酸性蛋白:将滤液调整pH至2-3,搅拌10分钟后静置澄清。再调pH至6.5,加2倍无离子水,使氯化钠浓度为1mol/L左右。
沉淀与干燥:向溶液中加入95%乙醇,存放至清液,虹吸除去上清液,沉淀抽干脱水干燥即得成品。
浸出与提取:将洁白干净的碎软骨置于提取罐内,加3-3.5mol/L氯化钠溶液使骨渣完全浸没。用50%氢氧化钠液调pH至12-13,搅拌提取10-15小时,过滤,滤渣重提一次。
盐酸盐解:将提取液用2mol/L盐酸调pH为7-8,迅速升温至80-90℃,保温20分钟,冷却后过滤。
除酸性蛋白:将滤液调整pH至2-3,搅拌10分钟后静置澄清。再调pH至6.5,加2倍无离子水,使氯化钠浓度为1mol/L左右。
沉淀与干燥:向溶液中加入95%乙醇,存放至清液,虹吸除去上清液,沉淀抽干脱水干燥即得成品。
原料处理:将鲸鱼软骨绞碎,加入1mol/L氢氧化钠溶液浸泡40℃保温2小时或用pH7.5的水浸泡。加蛋白酶于55℃保温水解20小时。
酸中和与调整浓度:用水调pH至中性,调整氯化钠浓度至0.5mol/L。
树脂吸附与洗脱:将溶液通过Amberlite IRA-933型离子交换树脂柱吸附后,用0.5 mol/L氯化钠溶液洗涤再用1.8 mol/L氯化钠溶液洗脱。以2L/h流速洗脱,洗脱液脱盐,乙醇沉淀,离心收集沉淀。
干燥:真空干燥即得成品。
应用此工艺制得的硫酸软骨素样品经纸电泳检查为单一区带,抗原物质试验结果阴性,含硫量为7.2%。其优点是酶水解或稀碱水解与树脂交换技术相结合,保证了分子不降解,解决了成品纯度问题。方法简便,收率高,是一种较有实用价值的制备方法。