烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide, NAD+)及其衍生物在生物学和医学研究中扮演着重要角色。NAD+不仅是许多代谢途径中的关键辅因子,还与细胞老化、炎症反应及能量产生密切相关。以下是对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸生产和提取方法的总结:
生产方法
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从酵母提取法:
- 将新鲜压榨酵母搅拌后加入沸水,并加热至95℃保温5分钟。
- 然后迅速加入两倍酵母质量的冰块,过滤,洗涤滤饼2次,合并滤液和洗液。
- 加入强碱性季铵I型阴离子交换树脂(如201×7, 717)搅拌16小时,过滤收集滤液。
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吸附、洗脱:
- 将滤液调pH值至2-2.5,并通过弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂(如122柱)吸附。
- 经无热原水洗涤后用0.3mol/L氢氧化铵溶液洗脱,收集淡咖啡色且吸光度大于0.05的洗脱液。
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中和、再次吸附:
- 将洗脱液与强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂(如001×7, 732)混合搅拌,直至pH=5-7。
- 然后用稀氨水调至pH值约15%,再通过强碱性季铵I型阴离子交换树脂柱吸附,用水洗至无色。
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活性炭与树脂串联吸附、洗脱:
- 使用766型活性炭与201×7树脂串联进行洗脱。
- 用0.1mol/L氯化钾溶液洗脱后通过活性炭柱吸附,再分别使用pH9的热原水和4%乙醇洗涤至中性,并用水洗净至中性。
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沉淀、干燥:
- 在洗脱液中加入30%-40%硝酸调至pH2-2.5。
- 过滤,冰库过夜后过滤,用95%冷丙酮洗涤,最后真空干燥得到成品。
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其他生产方法还包括使用醋酸铅酸化沉淀和甲酸型阳离子交换树脂柱处理的方法来精制粗品。
这些步骤确保了NAD+的高纯度与高效提取。不同的工艺路线可以根据实际条件和需要进行选择或优化,以适应实验室研究或工业生产的不同需求。