DNA聚合酶 | 9012-90-2

• 物质功能分类: 生物 - 蛋白与多肽 - 酶及活性检测
• 分子结构分类: 转移含磷基团 - 转移酶 - 核苷酸转移酶
• 中文名称: DNA聚合酶
• 中文别名: DNA 聚合酶
• 英文名称: DNA-directed DNA polymerase
• 英文别名: DNA polymerase I；DNA polymerase II；DNA polymerase III；DNA polymerase alpha；DNA polymerase beta；DNA polymerase gamma；DNA nucleotidyltransferase (DNA-directed)；deoxyribonucleate nucleotidyltransferase；deoxynucleate polymerase；deoxyribonucleic acid duplicase；deoxyribonucleic acid polymerase；deoxyribonucleic duplicase；deoxyribonucleic polymerase；deoxyribonucleic polymerase I；DNA duplicase；DNA nucleotidyltransferase；DNA polymerase；DNA replicase；DNA-dependent DNA polymerase；duplicase；Klenow fragment；sequenase；Taq DNA polymerase；Taq Pol I；Tca DNA polymerase
• CAS: 9012-90-2

安全信息

• TSCA：
  Yes
• 危险品标志：
  Xi
• 安全说明：
  S24/25,S26,S36,S36/37
• 危险类别码：
  R36/37/38,R43
• WGK Germany：
  3

制备方法与用途

DNA聚合酶简介

DNA聚合酶是细胞中不可或缺的作用酶，负责复制DNA。以DNA为模板，在5’端开始合成到3’端的酶，主要活性在于催化DNA的合成（需具备模板、引物和dNTP等条件），同时具有其他辅助功能。

特性

TAq DNA聚合酶除了拥有快速合成和较高的出错率外，还具有一种独特的特性——合成产物末端带有A碱基。这一特性是TA克隆的基础：PCR产物在3'末端会多一个A，只需与其互补的T存在，便可通过接合酶连接起来。此方法省去了使用限制性内切酶的时间，直接利用PCR产物和质粒两端的互补序列快速黏连。

应用

TAq DNA聚合酶广泛应用于聚合酶链式反应（PCR），特别适用于扩增短DNA片段。从温泉与深海热泉中分离出的TAq酶能够承受PCR所需的高温，因此取代了原先用于PCR中的大肠杆菌DNA聚合酶。

作用机制

DNA聚合酶Ⅰ沿模板DNA延长新合成的DNA链，并依赖RNA引物进行延伸；3-5外切酶负责纠正未正确配对的脱氧核苷酸。随着DNA复制的进行，下游的RNA引物逐渐靠近聚合活性位点，最终脱离模板形成flap DNA。在热涨落的作用下，flap DNA从聚合酶区域脱落；同时，在热运动的影响下，5`核酸酶区逐步向聚合酶区移动并捕获flap DNA，切除RNA引物，留下一个小缺口，随后由DNA连接酶修补完成。