摘要:
2型异戊烯基二磷酸:二甲基烯丙基二磷酸异构酶(IDI-2,EC 5.3.3.2)是一种黄素蛋白,需要FMN,NADPH和Mg2 +才能将异戊烯基二磷酸转化为二甲基烯丙基二磷酸。为了研究IDI-2的反应机理,用过表达的IDI-2(MjIDI)处理了基于机理的1型IDI(IDI-1)抑制剂3,4-环氧-3-甲基丁基二磷酸酯(EIPP)。 )来自产甲烷的古生甲烷菌(Methanocaldococcus jannaschii)。EIPP显示出时间和浓度依赖性抑制(KI; 56.5 mM,k(inact); 0.10 s(-1),k(inact)/ KI; 1.76 s(-1)M(-1))和紫外线EIPP处理后的MjIDI的可见光谱与未处理的MjIDI的光谱明显不同。这些结果表明,EIPP通过MjIDI活性位点的共价键修饰了FMN。从反应混合物中分离出形成的EIPP-FMN配合物,配合物的光谱分析表