摘要:
冻干条件的改变不仅显著提高了不溶性天然枯草杆菌蛋白酶的活性,还提高了苯中可溶性酶的活性。通过可溶化(提高100倍)和调整冻干条件(提高10倍),N-乙酰-L-苯丙氨酸乙酯与苯中1-丙醇的酯交换反应的催化活性(kcat/Km)提高了1000倍以上。用聚乙二醇(PEG-Sub)对枯草杆菌蛋白酶进行了修饰,使其能够在有机溶剂中溶解。研究了冻干前水溶液中酶溶液的pH值、盐或底物类似物对天然枯草杆菌蛋白酶和PEG-Sub催化活性的影响。天然枯草杆菌蛋白酶和PEG-Sub的活性都取决于pH值。盐的存在提高了PEG-Sub和天然枯草杆菌蛋白酶的活性。底物类似物N-Ac-L-Phe的存在也提高了天然枯草杆菌蛋白酶和PEG-Sub的活性。这些结果表明,有机溶剂可溶化的枯草杆菌蛋白酶受冻干条件的影响。