cloned ketoreductase expressed in E_. coli SC₁₆₅₂₉

• 英文名称: cloned ketoreductase expressed in E_. coli SC₁₆₅₂₉

反应信息

• 作为试剂：
  描述：

  2,3'-二氯苯乙酮 在 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶来源于肠系膜明串珠菌(冻干) 、 cloned ketoreductase expressed in E_. coli SC₁₆₅₂₉ D-glucose 6-phosphate (Na) 、 还原型辅酶II(NADPH)四钠盐 、 1,4-二巯基-2,3-丁二醇 作用下， 以 甲醇 、 phosphate buffer 为溶剂， 生成 (1S)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇
  参考文献：
  名称：

  用于手性醇制备的酮还原酶的纯化和克隆

  摘要：

  在抗癌程序中，主要候选化合物的合成需要以（S） -2-氯-1-（3-氯苯基）-乙醇为中间体。其他可能的候选化合物使用了S-醇的类似物。在为将相应的酮还原为S醇而筛选的119种微生物培养物中，多形汉逊酵母ATCC 58401（73.8％ee）和球形红球菌ATCC 21505（71.8％ee）具有产生所需醇的最高对映选择性。多形汉逊酵母中的酮还原酶纯化至均质后，得到S-酒精含量为100％的ee。来自纯化酶的氨基酸序列用于设计PCR引物，用于克隆酮还原酶。克隆的酮还原酶需要NADP（H），亚单位分子量为29,220，天然分子量为88,000。克隆的酮还原酶与来自酿酒酵母的克隆的6-磷酸葡萄糖磷酸脱氢酶一起在大肠杆菌中表达，以使酮还原酶所需的NADPH再生。包含两种重组酶的大肠杆菌提取物用于将2-氯-1-（3-氯-4-氟苯基）-乙酮和两种相关的酮还原为相应的S-醇。完整的带有葡萄糖的大肠杆菌细胞用于制备（S）

  DOI：

  10.1002/adsc.200505045